Optimización de la Transformación Genética Transitoria Mediada por Agrobacterium en Especies Frutales Tropicales

Resumen

El comercio global de frutas tropicales crece año con año. A pesar de la importancia económica que representa el cultivo de estas plantas y que algunas especies ya cuentan con su genoma completamente secuenciado, la investigación en genómica funcional y su aplicación en el mejoramiento genético es limitada, principalmente por la dificultad en la transformación genética. Por lo anterior, nuestro objetivo ha sido optimizar parámetros de sobreexpresión transitoria de genes mediada por Agrobacterium en frutales tropicales de importancia económica, como son aguacate, cacao y limón mexicano. Se evaluaron diferentes métodos de infiltración, cepas de Agrobacterium, pretratamientos de las hojas y el efecto de coadyuvantes como fitohormonas, surfactantes e inductores de genes de virulencia. Se utilizó el reportero visual RUBY, que produce betalainas, para cuantificar la eficiencia de los tratamientos. Nuestros resultados demuestran por primera vez la utilidad del reportero visual RUBY en las tres especies. La agroinfiltración al vacío fue el tratamiento más efectivo en aguacate y cacao, en estas especies la cepa de Agrobacterium LBA4404 generó mayor acumulación de betalainas; mientras que en hojas de limón mexicano, la mejor cepa fue GV3101. En aguacate, el tratamiento con microheridas y el uso de ácido jasmónico (250 μM) mostró un efecto sinérgico. En hojas maduras de limón mexicano, la combinación de microheridas, ditiotreitol (100 μM) y el surfactante Silwet (0.02%) incrementó significativamente la expresión transitoria. Estos resultados representan un avance clave para el estudio funcional de genes en frutales tropicales y sientan las bases para su eventual mejoramiento genético.