Hojas Separadas como Modelo Funcional para Estudios Moleculares en Aguacate: Prueba de Concepto para VIGS

Abstract

El aguacate (Persea americana Mill.) es un cultivo de alta relevancia económica en México, pero presenta grandes retos para el estudio de la función génica debido a su naturaleza recalcitrante a la transformación genética y a su propagación vegetativa. Ante la ausencia de reportes sobre silenciamiento génico en esta especie, este estudio propone una estrategia novedosa basada en el uso de hojas separadas como sistema experimental para validar la viabilidad de ensayos de silenciamiento génico inducido por virus (VIGS). El objetivo fue evaluar la supervivencia fisiológica de las hojas separadas bajo distintas condiciones que permitan su uso en ensayos moleculares transitorios. Se evaluaron de forma cualitativa cuatro aspectos: (1) tiempo máximo de supervivencia de hojas separadas; (2) efecto de la suplementación vía pecíolo con agua o benziladenina (BA); (3) viabilidad funcional a través de la desetiolación o enverdecimiento; y (4) respuesta fisiológica a la agroinfiltración con Agrobacterium tumefaciens. Los resultados mostraron que las hojas maduras presentan mayor viabilidad que las jóvenes, y que el suministro de BA no tuvo efectos significativos sobre la longevidad del tejido. Se observó enverdecimiento gradual en hojas etioladas, lo que sugiere actividad metabólica en hojas separadas. Asimismo, la agroinfiltración con DO600 0.6 permitió mantener la viabilidad sin inducir necrosis severa, en contraste con DO600 1.2. Estos resultados validan la factibilidad del uso de hojas separadas de aguacate como un sistema alternativo para la evaluación rápida de estrategias de silenciamiento génico en especies difíciles de transformar.